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貨號：633701

產(chǎn)品簡述

——為推動單細(xì)胞研究的進(jìn)展，測序巨頭相繼推出新一代測序儀，其中BD RhapsodyTM單細(xì)胞分析系統(tǒng)便是其中的佼佼者，此系統(tǒng)的誕生基于BD在細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域40年的專業(yè)技術(shù)，克服了傳統(tǒng)檢測的局限性，能夠?qū)Τ扇先f個單細(xì)胞的數(shù)百個表達(dá)基因同時進(jìn)行數(shù)字定量，每個細(xì)胞提取獨立數(shù)據(jù)，體現(xiàn)異質(zhì)性，可以鑒定和表征新型和罕見細(xì)胞類型，有助于理解從免疫學(xué)到腫瘤學(xué)等多個領(lǐng)域內(nèi)的生物學(xué)過程。

BD RhapsodyTM單細(xì)胞分析工作流程

BD Rhapsody核心技術(shù)

——BD Rhapsody利用微孔進(jìn)行單細(xì)胞分離，屬于Micriwell-seq。20萬個微孔的尺寸被設(shè)計成一個微孔恰好可以容納一個bead（磁珠），bead上連接逆轉(zhuǎn)錄引物，引物主要包括以下幾個部分:

• CL（cell label,細(xì)胞標(biāo)簽），一個磁珠上的引物CL序列相同，不同磁珠上的引物CL序列不同，從而達(dá)到區(qū)分序列的作用

• UMI(unique molecular identifier)，一個磁珠上的引物UMI各不同，可以區(qū)分最初的mRNA分子，以便后期分析時消除擴(kuò)增帶來的偏差

• poly dT，和mRNA 3'端poly A互補(bǔ)配對。同時懸液被稀釋到適當(dāng)濃度，微孔隨機(jī)捕獲單細(xì)胞，單細(xì)胞捕獲率為80%，捕獲1K個細(xì)胞出現(xiàn)的多細(xì)胞比率約為0.2%，捕獲10K個細(xì)胞多細(xì)胞比率約為2.4%。Rhapsody建議檢測通量為100-10000。

一個微孔=一個單細(xì)胞=一個磁珠=一個RNA-Seq

BD Rhapsody技術(shù)優(yōu)勢

• 靶向基因檢測，避免看家基因占用大量測序數(shù)據(jù)，節(jié)省測序和分析成本

• 靶向定制panel，選定特定基因組合，提高UMI計數(shù)效率，罕見轉(zhuǎn)錄本檢測閾值更低

• 引入單細(xì)胞測序金標(biāo)準(zhǔn)，BD分子標(biāo)簽，降低非特異性表達(dá)

• 完整cDNA可在磁珠微球結(jié)構(gòu)保存長達(dá)16周，隨用隨取

• 單次實驗AbSeq kit通過獨特的抗體標(biāo)記方法，既可以提高樣品通量（最多12個樣本同時建庫，可等分，可隨機(jī)組合），又可同時進(jìn)行單細(xì)胞蛋白和轉(zhuǎn)錄組聯(lián)合檢測，降低成本的同時，也為單細(xì)胞多組學(xué)研究提供了更高 效的平臺

• 可分辨更精細(xì)、微觀的細(xì)胞群和細(xì)胞亞種群

• 捕獲效率高達(dá)97%，遠(yuǎn)高于市場上目前所有大通量單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)