分辨率媲美N-SIM的個人超分辨率顯微鏡

 N-SIM E運(yùn)用結(jié)構(gòu)照明顯微鏡技術(shù)，實(shí)現(xiàn)了2倍于傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡的空間分辨率（約115nm）。作為一套精簡、經(jīng)濟(jì)的超分辨率系統(tǒng)，N-SIM E支持常用的激發(fā)波長和基本的成像模式，是個人實(shí)驗(yàn)室的理想選擇。 

● 兩倍于傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡的高分辨率

 N-SIM E 結(jié)合“結(jié)構(gòu)照明顯微技術(shù)”，并搭配尼康知名的CFI超分辨率復(fù)消色差TIRF 100x油鏡（NA 1.49），將空間分辨率提升至傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡的近2倍（約115nm），可以觀察細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)的微小細(xì)節(jié)以及它們之間的相互作用。

*488nm激光激發(fā)，3D-SIM模式

超分辨率成像（Slice 3D SIM 模式）     傳統(tǒng)寬場成像

YFP標(biāo)記的B16黑色素瘤細(xì)胞微管

物鏡：CFI 復(fù)消色差TIRF 100x 油鏡（NA 1.49）

成像速度：約1.8秒/幀（動態(tài)）

圖片由日本理化研究所定量生物學(xué)中心，細(xì)胞極性調(diào)控實(shí)驗(yàn)室，Yasushi Okada博士提供。

超分辨成像（Slice 3D SIM 模式）      傳統(tǒng)寬場成像

GFP標(biāo)記的活體HeLa細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)

物鏡：CFI 復(fù)消色差TIRF 100x 油鏡（NA 1.49）

成像速度：約1.5秒/幀（動態(tài)）

圖片由福島醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)院，生物醫(yī)學(xué)研究所，Ikuo Wada博士合作拍攝。

 ● 1幀/秒的時間分辨率，快速超分辨率成像

N-SIM E實(shí)現(xiàn)高速超分辨圖像獲取，時間分辨率約1秒/幀，支持活細(xì)胞高分辨成像。

 ● 3D-SIM模式提供Z軸超高分辨率成像

Slice 3D SIM模式用于300nmZ軸分辨率的光學(xué)斷層超分辨率成像。Stack 3D-SIM模式（選配）用于厚樣品的多層序列超分辨率成像，具有比Slice 3D-SIM模式更高的成像對比度。

 
 超分辨成像（Slice 3D SIM 模式）     傳統(tǒng)寬場成像

尼羅紅標(biāo)記的枯草芽孢桿菌細(xì)胞膜（紅色），和GFP標(biāo)記的細(xì)胞分裂蛋白DivIVA（綠色）。超分辨率顯微鏡可以精確定位細(xì)胞分裂過程中的相關(guān)蛋白。

圖片由紐卡斯?fàn)柎髮W(xué)細(xì)菌細(xì)胞生物學(xué)中心， Henrik Strahl博士和 Leendert Hamoen 博士提供。 

   Stack 3D SIM 模式（立體視圖）                       Stack 3D SIM模式（最大投射）

Alexa Fluor 488標(biāo)記小鼠角質(zhì)細(xì)胞中的角蛋白中間纖維。

圖片由德國亞琛工業(yè)大學(xué)，Reinhard Windoffer博士提供。 

 ● 3激光多色超高分辨率成像

 N-SIM E專用的緊湊型LU-N3-SIM 激光臺，預(yù)裝了最常用的3個激光器（488/561/640），可進(jìn)行多色超分辨率成像。用于研究細(xì)胞水平多個蛋白間相互作用以及動態(tài)過程。 

 ? 結(jié)構(gòu)照明顯微鏡原理   

通過對覆蓋已知高空間頻率圖案所產(chǎn)生的莫爾紋進(jìn)行分析處理，可從數(shù)學(xué)上恢復(fù)標(biāo)本的亞分辨結(jié)構(gòu)。

使用高空間頻率的激光干涉照明標(biāo)本，標(biāo)本內(nèi)的亞分辨結(jié)構(gòu)產(chǎn)生莫爾條紋，這些莫爾條紋中包含標(biāo)本經(jīng)過調(diào)制的亞分辨率結(jié)構(gòu)信息。捕獲莫爾條紋并通過影像技術(shù)進(jìn)行處理，可復(fù)原未知的樣品信息，實(shí)現(xiàn)超越傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡極限的卓越分辨率。

                                                                                                                  條紋圖案照明輻射配合一直的空間頻率，能夠獲取莫爾條紋等細(xì)微結(jié)構(gòu)的信息。

通過處理多個莫爾條紋影像創(chuàng)建超分辨率影像

  在此處理過程中，捕獲3道德莫爾條紋影像包含標(biāo)本內(nèi)微小結(jié)構(gòu)的信息。顯微鏡對結(jié)構(gòu)照明的多個相位和方向進(jìn)行捕捉，并從莫爾條紋信息中提取出“超分辨率”信息。然后顯微鏡將此信息以數(shù)學(xué)方式組合到“傅立葉”或孔徑空間中，接著將其轉(zhuǎn)換回影像孔徑，從而產(chǎn)生分辨率兩倍于傳統(tǒng)顯微鏡的影像。

 使用高頻條紋照明使分辨率翻倍

 高分辨率、高空間頻率信息的捕捉收到物鏡數(shù)值孔徑（NA）的限制，且超過光學(xué)系統(tǒng)孔徑的結(jié)構(gòu)孔徑頻率被去除（圖A）。

 通過高頻結(jié)構(gòu)化照明技術(shù)提高樣本亮度，超越傳統(tǒng)的分辨率限制，令樣本中的未知結(jié)構(gòu)清晰可見，在光學(xué)系統(tǒng)光圈內(nèi)轉(zhuǎn)顯微鏡不為人知的“超分辨率”信息（圖B）。

 然后此“超分辨率”信息以數(shù)學(xué)形式與物鏡捕捉到的標(biāo)準(zhǔn)信息組合在一起，從而使得NA和光學(xué)系統(tǒng)的分辨率有效翻倍（圖C）。

圖A：分辨率受到物鏡NA的限制

圖B：結(jié)構(gòu)照明和標(biāo)本中物鏡無法分辨出的細(xì)微結(jié)構(gòu)共同作用，產(chǎn)生莫爾條紋

圖C：捕捉到約為NA角度兩倍角度的射線 

  ●超分辨率顯微鏡專用物鏡  

可配置100x或60x超分辨率專用物鏡，其中100x油鏡適用于固定標(biāo)本的拍攝，而60x水鏡更適合活細(xì)胞長時間成像。

 超分辨率物鏡針對尼康超分辨率顯微鏡設(shè)計研發(fā)，具有極`佳的光學(xué)表現(xiàn)。每顆物鏡均經(jīng)過嚴(yán)格的檢查和挑選，具有zuidi的光學(xué)相差，確保優(yōu)異的光學(xué)性能。

CFI SR Plan Apochromat IR 60x WI                                      CFI SR Apochromat TIRF 100x oil