產(chǎn)品信息
 

產(chǎn)品描述
 

2,3,5-氯化三苯基四氮唑，又稱四唑紅，簡(jiǎn)稱TTC，TTZ，或TPTZ，一種脂溶性光敏感復(fù)合物，既可用來(lái)檢測(cè)種子的生存能力，也可用來(lái)檢測(cè)哺乳動(dòng)物組織的缺血梗塞。檢測(cè)機(jī)制在于TTC本身可作為一種氧化還原指示劑，活細(xì)胞內(nèi)的脫氫酶（尤其是線粒體內(nèi)的琥珀酸脫氫酶）可以將TTC還原為紅色甲臢化合物TPF（1,3,5-triphenylformazan）。對(duì)于種子或者植物組織來(lái)說(shuō)，染色結(jié)果為活組織被染成不同程度的紅色，死組織或者無(wú)生命力的組織不著色。對(duì)于缺血梗塞組織，因組織壞死脫氫酶活力喪失呈現(xiàn)蒼白色，而正常組織呈深紅色。TTC常用的染色濃度為2%（w/v），也可根據(jù)組織類型做濃度的適當(dāng)調(diào)整。

產(chǎn)品性質(zhì)
 

運(yùn)輸和保存方法
 

常溫運(yùn)輸。4°C避光保存，6年有效。

染色方法
 

1.1染色工作液的配制
 

TTC通常用磷酸緩沖鹽溶液來(lái)配制，pH范圍為6.5-7.5之間，常用的工作濃度為2%，也可用1%或者更低的濃度，根據(jù)自身實(shí)驗(yàn)體系調(diào)整。

可使用以下的緩沖鹽體系配制：

1）取9.078 g KH2PO4（Mw：136.09）溶于1L去離子水內(nèi)，制備成66.7 mM KH2PO4儲(chǔ)存液；取9.472 g Na2HPO4·H2O（Mw：137.99）溶于1 L去離子水內(nèi)，制備成68.6 mM Na2HPO4儲(chǔ)存液；將兩份KH2PO4儲(chǔ)存液與1份Na2HPO4儲(chǔ)存液充分混合，即得到需要的磷酸緩沖液溶液。

 2）根據(jù)需要的TTC工作液濃度來(lái)制備，如加入2 g TTC粉末到100 mL混合的磷酸鹽緩沖液中，即得到2%的染色工作液。此時(shí)的溶液pH值在6.5-7.5之間。此工作液可裝到不透明的白色瓶或者棕色瓶子內(nèi)，4°C保存幾個(gè)月穩(wěn)定。

【注意：TTC染色液的緩沖體系可根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)習(xí)慣來(lái)調(diào)整；也可用去離子水來(lái)溶解配置成10 mg/mL的儲(chǔ)存液，過(guò)濾除菌，建議此法染色液當(dāng)天使用?！?/span>

1.2染色方法（動(dòng)物組織）
 

1）取新鮮組織切片放到裝有TTC染色液的染色容器內(nèi)，37℃避光孵育15-30 min，邊孵育邊觀察顏色變化；【注意：TTC染色液可重復(fù)使用2-3次，可將用過(guò)的TTC染色液放到新的容器內(nèi)繼續(xù)使用?！?/span>

2）【可選】輕柔的吸取緩沖液（如1×PBS）將組織表面多余的染色液沖洗掉；

3）此時(shí)即可觀察或者拍照。若需長(zhǎng)久保存，用4%多聚甲醛溶液（貨號(hào)：36314ES76）固定10-20 min。

注意事項(xiàng)
 

1）本品具有微量的光和熱敏感性，使用以及存放的過(guò)程中避免長(zhǎng)時(shí)間曝光或者接觸到過(guò)高溫度下。

2）為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
3）本產(chǎn)品僅作科研用途！

HB190124